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离子交换层析分离纯化漆酶+开题报告+参考文献

更新时间:2011-4-24:  来源:毕业论文

离子交换层析分离纯化漆酶+开题报告+参考文献
一、立题依据(国内外研究进展或选题背景、研究意义等)
漆酶(Laccase, EC 1.10.3.2)是一种含铜离子的多酚氧化酶,最早发现于日本紫胶漆树
Rhus vernicifera 的浸出液中,现已证实一些高等真菌(主要是白腐真菌)也能分泌漆酶。白腐真菌是生物圈中木质素、纤维素和半纤维素的重要降解者,其分泌的漆酶在木质素降解过程中起着重要作用。
本研究所用粗毛栓菌Trametes gallica 是一种能够分泌漆酶的白腐真菌,可降解麦草木质纤维素。要研究漆酶降解底物的机理,必须首先对漆酶进行分离纯化。目前,离子交换、凝胶过滤、电泳(包括双向电泳)和生物质谱技术等现代分离分析方法的发展,把生物大分子物质的分离和纯化工作提高到新的阶段。
二、研究的主要内容及预期目标
1、本文主要测定了粗毛栓菌在一种以麦草粉为诱导物的培养液中的产漆酶情况,并对酶的一些基本性质进行了研究,以便为其在生产中的应用提供理论依据。

2、对粗毛栓菌产漆酶的分离纯化及其部分性质进行初步研究。

3、对粗毛栓菌漆酶进行纯化, 并对性质进行探讨, 以便为木质素的降解的研究提供一定的科学依据, 同时为在造纸工业和环保工业上的应用提供一定的理论依据。
三、研究方案(思路)
盐析→离心→透析→浓缩→离子交换柱层析→酶活力及蛋白含量的测定
四、论文进度安排
   1、3月30日,硫酸铵盐析。
   2、4月2日,酶液离心。
   3、4月5日,透析,除去小分子物质。
   4、4月10日,测粗酶液的比活力和蛋白含量。
   5、4月20日,用聚乙二醇浓缩酶液。
   6、4月25日,离子交换柱对漆酶的柱层析。
   7、5月3日,收集酶液,测定的酶活力和蛋白含量
   8、5月17日,计算酶液回收率和纯化
五、主要参考文献
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