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生物科学粗毛栓菌漆酶cDNA的PCR扩增+参考文献

更新时间:2011-5-23:  来源:毕业论文

生物科学粗毛栓菌漆酶cDNA的PCR扩增+参考文献
问1:现已经获得了两条cDNA片段,如何据此获得全长cDNA?
答:(1)对已经获得的两段cDNA进行测序,根据测序结果在现有的cDNA片段上找限制性酶切位点;
(2)选一适当的酶切位点,设计引物,所设计的5’-RACE的下游引物及3’-RACE的上游引物分别含有该酶切位点,并含有2-3个保护碱基;
(3)分别做5’-RACE和3’-RACE;
(4)分别将上述5’-RACE和3’-RACE产物用上述限制酶酶切,分别回收酶切产物;
(5)用连接酶连接,即得全长cDNA。
问2:进行RT-PCR时所用的引物一般有几个保护碱基?
答:为了将来保证限制性内切酶能够有效地结合并切割DNA,一般在PCR反应所用引物的酶切位点后加2-3个保护碱基。当引物内没有将来所用的限制性酶切位点时,一般不用加保护碱基。在本次试验中,由于没有在引物末端加入酶切位点,所以没有加保护碱基。
论文答辩评语:
该生介绍了论文的主要目的、内容与结果,能够正确回答有关提问。该生具备了一定的独立从事科学研究的能力。该论文达到了学士学位论文的水平。
该生认真查阅参考文献,实验方案设计合理,在规定时间内完成了预定任务,初步掌握了从事有关研究的基本实验技能,具备了一定的独立从事科学研究的能力,达到了本科生的培养目标。该文达到了学士学位论文水平。原文请找腾讯752018766六:维~论;文.网http://www.lwfree.cn
指导教师初评成绩  指导教师签名   年   月   日
    论文表明,该同学查阅了相关文献资料,论文内容较为完整,技术运用恰当,表明该生具备了一定的独立从事科学研究的实验技能。该论文达到了学士学位论文水平,同意论文答辩。
评阅教师评定成绩  评阅教师签名   年   月   日
该生能够清晰地陈述自己的主要研究目的、实验方法和结果,同时能够正确地回答相关问题,说明该生掌握了相关理论知识和实验技能。论文设计合理,内容新颖。综上所述,该论文达到了学士学位论文水平。
答辩小组评定等级  组长签名   年   月   日
综合指导教师、评阅人意见和学生答辩过程中的表现,经过认真讨论,一致同意该同学顺利通过毕业论文答辩,并建议授予学士学位。
目  录
摘要1
关键词1
Abstract1
Key words1

引言1
1  材料与方法2
1.1  主要仪器与试剂用品 2
1.1.1主要仪器2
1.1.2主要试剂2
1.1.3主要用品2
1.2  菌株及培养方式2
1.2.1菌株2
1.2.2培养基3
1.3  PCR引物3
1.4  总RNA的提取与检测3
1.4.1  总RNA的提取3
1.4.2  总RNA的甲醛变性琼脂糖凝胶电泳4
1.4.3  总RNA纯度与浓度的检测4
1.5 RT-PCR4
1.5.1  逆转录4
1.5.2  总 cDNA的PCR扩增4
1.5.3  PCR扩增产物的琼脂糖凝胶电泳5
2  结果与讨论 5
2.1  总RNA电泳结果5
2.2  总RNA纯度与浓度5
2.3  PCR扩增结果6
参考文献6
致谢7,1844

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