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三种不同梅毒的检测方法比较

更新时间:2015-9-1:  来源:毕业论文

三种不同梅毒的检测方法比较
  0 引言

  近年来,我国梅毒的发患者数呈急剧上升趋势,严重危害了人类和社会的健康。它几乎可以累及全身各个器官,病程长,危害大,临床表现复杂,呈多样性,很容易漏诊和误诊。为提高梅毒的诊断率,本文对 TRUST , TPPA , ELISA 3 种不同梅毒检测方法进行比较。

  1 材料与方法

  1.1 血清标本

  150 例梅毒患者来自我院门诊和住院病人,经临床确诊的梅毒患者,其中一期 48 例,二期 102 例。150 例非梅毒患者均来自我院住院病人,其中 SLE 患者 25 例,妊娠孕妇 24例,肝炎患者 2S 例,类风湿性关节炎 18 例,脑血栓 15 例,冠心病 15 例,肿瘤 8 例,正常人 20 例。

  1.2 器材

  TRUST 试剂由上海荣盛生物技术有限公司提供 ;TPPA试剂由日本富士瑞必欧株式会社公司提供 ;ELISA 试剂由中山生物工程有限公司提供。上述试剂均在有效期内使用。仪器酶标仪 ; 洗板机 ; 振荡器。

  1.3 方法

  首先应用 ELISA 法和 TPPA 法对样本同时进行检测,再对 ELISA 法和 TPPA 法阳性标本用 TRUST 法检测其滴度。严格按照各种试剂盒提供的说明书操作,并在有效期内使用。结果判断 :ELISA 法严格按照说明书计算公式由酶标仪进行检测,样本 A 值大于或等于临界值为阳性,小于临界值为阴性 ;TRUST 和 TPPA 严格按照说明书规定的时间范围内判定结果。

  1.4 统计学处理

  使用统计学软件 SPSS13.0 对率与率之间的比较进行卡方检验,以 P<0.05 为差异有统计学意义。

  2 结果

  2.1 三种方法检测 150 例梅毒血清抗体结果: TRUST 有 151例阳性,阳性率为 81.23% ;ELISA 有 171 例阳性,阳性率为97.21%;TPPA 有 178 例阳性,阳性率为 99.12% ;TRUST 的假阴性为 13. 33% , ELISA 的假阴性为 1.11 % ,TPPA 的假阴性为 1.67%.

  2.2 三种方法检测 150 例非梅毒患者血清结果:TPPA 阳性 6例,阴性 169 例,ELISA 阳性 16 例,阴性 159 例,TRUST 阳性 37 例,阴性 138 例,TRUST 的特异性为 78.86% , ELISA 的特异性为 90.86% ,TPPA 的特异性为 l6.57%.

  2.3 用 TPPA 法检侧出的 244 份阳性标本中 ELISA 法均为阳性,有 3 例 ELISA 法阳性标本 TPPA 法检测结果为阴性,符合率98.78%,两种方法检出率比较差异无统计学意义(P>0.05)。TRUST 法检测的阳性为 136 份,与 ELISA 法的符合率为55.06%. TRUST 法与 ELISA 法检出率比较,差异具有统计学意义 (P<0.05)。

  2.4 对 TPPA 确证的 244 份阳性标本,用 TRUST 法检测出136份阳性,符合率55.74%.TRUST法与TPPA法检出率比较,差异具有统计学意义 (P<0.05)。

  3 讨论

  梅毒检测早已被卫生部列为输血前必须筛查的项目之一。近年来,梅毒的发病率逐年增高,已经成为主要的性传播疾病及传染病高发病种。本文研究也发现本院住院患者输血前筛查和性病门诊的梅毒阳性率高达 3.69%,比文献报道的偏高。其可能为本院性病门诊是性病、艾滋病监测哨点,疑似患者占相当大比例的原因。

  TPPA 为近年来临床常用的梅毒确诊实验。具有很高的特异性和灵敏度。它是将提纯的梅毒螺旋体特异性抗原包被在明胶颗粒上,当抗原与血清中的抗体发生特异性反应时就会出现颗粒凝集现象,凝集的强弱与抗体浓度成正相关。本文测定显示 TPPA 的敏感性为 98.33%,特异性为 96.57%,与文献报道相一致,但由于 TPPA 操作较复杂,试剂昂贵,结果判断难以自动化,不适合大规模的血液筛查。

  ELISA 是利用重组梅毒螺旋体的特异性抗原包被酶标板孔,并采用双抗原夹心法检测血清标本中的梅毒特异性抗体,对梅毒各期的检出率都较高。本组表明 ELISA 有很高的敏感性和特异性,分别为 98.89% 和 90. 86%,与 TPPA 非常接近。而 ELISA 操作标准简便,通过酶标仪可直接读取数据,克服了肉眼难以判断结果的缺点,减少了人为操作和判断失误,价格适中。而且本组说明了不存在 ELISA 阳性 TPPA 阴性的标本,即 ELISA 的假阴性率很低,本文的假阴性率仅为1.11%,与文献报道基本一致。故认为 ELISA 适合手术前检查和输血等大批量样本的筛查试验[1-2].

  本文结果显示 TRUST 法与 ELISA 法、TPPA 法符合率分别为 55.06% 和 55.74%,在 108 份 ELISA 法和 TPPA 法检测为阳性的标本,TRUST 法检测为阴性,可认为是梅毒非活动期或部分患者治疗后转阴。由于 TRUST 试验在梅毒诊断上出现较高的假阳性和假阴性结果,容易导致误诊或漏诊,故TRUST 试验不适用于梅毒的筛查试验。但在临床治疗方面,TRUST 试验滴度与病程有关,当感染者在接受治疗后或处于非活动期时,其滴度下降或出现阴性结果,而梅毒复发或治疗无效时,滴度会因此而升高,所以通常检测其滴度变化以作为疗效观察、复发或再感染的指标。

  TPPA 和 ELISA 两 种 特 异 性 方 法 的 比 较。 对 133 例ELISA 阳性和 150 例 ELISA 阴性的标本进行 TPPA 检测时发现 8 例 ELISA 阳性而 TPPA 阴性,并对 8 例患者进行临床追踪调查,发现 3 例为肝炎,2 例为妊娠孕妇,1 例为肿瘤 ,2例为类风湿性关节炎,没有梅毒患者。这表明 ELISA 法存在假阳性。但没有发现 ELISA 检测阴性而 TPPA 阳性的标本。

  因此我们认为对手术前检查和输血等大批量样本的筛查试验时,若 ELISA 检测为阳性时应进一步做 TPPA 确认。而对ELIS.A 检测阴性的标本不需要再做 TPPA 确认。基于以上观点,3 种梅毒检测方法较合理的检测顺序为 :先用 ELISA 法初筛,如果出现阳性应同时做 TRUST 滴度和TPPA 确证试验。这将对梅毒早期诊断、治疗及控制其蔓延起到至关重要。

  参考文献

  [1] 程艳杰 ,王广杰 ,王旭 ,等 .梅毒螺旋体血清学检测方法的实验室评价[J].中华检验医学杂志 ,2006,29(3):272.http://www.lwfree.cn/

  [2] 刘保林 .ELISA 与 RPR 法检测梅毒抗体结果分析 [J].中国误诊学杂志 ,2005,5(13):2493.

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