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牡丹ISSR反应体系的优化研究+正交试验设计(10)

时间:2016-12-07 19:00来源:毕业论文
Taq酶用量少会使扩增的条带变弱;用量过大,则非特异扩增产物含量会增加,Taq酶的用量通常以0.5U~1 U左右扩增效果较好[20,24],与本试验结果一致。 退火


Taq酶用量少会使扩增的条带变弱;用量过大,则非特异扩增产物含量会增加,Taq酶的用量通常以0.5U~1 U左右扩增效果较好[20,24],与本试验结果一致。
退火温度因引物变化而变化,大多数ISSR引物适合较高的退火温度,有时高于其Tm值,但并非同一物种所有引物为同一退火温度,有时差异较大。如本试验中UBC899引物的最适退火温度为45℃,远远低于其Tm值。一般来说,在Tm允许的范围内,尽量选择较高的退火温度,可以减少引物和模板之间的非特异性结合,提高PCR的特异性。因此在某种具体物种的反应体系建立时,不同引物的退火温度应逐一筛选。 牡丹ISSR反应体系的优化研究+正交试验设计(10):http://www.lwfree.cn/shengwu/20161207/749.html
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