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自杀基因回路控制下野生型与变异型菌群的生长速率比较

时间:2017-09-30 09:43来源:毕业论文
论文基于已有研究基础,利用群体感应-ccdB蛋白自杀质粒转化大肠杆菌,探讨自然界自杀行为不被突变菌株替代的生物学机制。特别是利用前期已经筛选到的突变型菌株,以生长速率为指
摘要:细菌的自杀行为是一种自然现象。对这一现象的产生和维持及其对细菌群体进化的影响的研究在理论和实践上都具有重要意义。本论文基于已有研究基础,利用群体感应-ccdB蛋白自杀质粒转化大肠杆菌,探讨自然界自杀行为不被突变菌株替代的生物学机制。特别是利用前期已经筛选到的突变型菌株,以生长速率为指标,比较突变型与野生型在相同环境中的适合度(fitness)差异。本论文通过突变型与野生型在制备的不同的上清液中的生长情况和在加入不同浓度的AHL的生长情况,发现突变型与野生型对AHL都敏感。同时在相同的环境中随着菌体密度的升高,野生型比突变型产出更多的AHL,并且AHL浓度不会随着菌体的大量死亡而下降。引起自杀程度最大的AHL初始浓度是100nM.13981
关键词: 细菌自杀;IPTG;群体感应;突变株
the Growth Rate of Wild Type and Mutant Emergence under the Control of Suicide Gene Circuit
Abstract: Suicide phenomenon of bacterium exists widely in nature.  It is important to investigate its mechanism in theory and effect in the bacterial group evolution in theory and in practice. In this study , quorum sensing-the ccdB protein suicide plasmid was transformed into E.coli, to explore the biological mechanisms that the suicidal behavior in nature is not substitution by mutant. Use pre-screened mutant strains, comparing the differences fitness of mutant and wild-type in the same environment by an indicator of growth rate. In this study, we observe the growth of Mutant and wild-type after they are inoculated  into the supernatant and different concentrations of the AHL, we found the mutant and wild type are sensitive to the AHL. And in the same environment, with the cell density increased, wild-type output the AHL more than mutant, the initial concentration of AHL is 100nM,a most notable bacterial suicide can be observed. 源自六`维`论^文-网.加7位QQ3249^114 www.lwfree.cn
Key Words: suicide; IPTG; quorum sensing; mutant emergence
目   录
1    前言    1
1.1 细菌的自杀行为    1
1.2 群体感应    1
1.3 细菌自杀回路    2
1.4 细菌自杀行为前期研究结果    3
1.5本课题研究的内容和意义    4
2    材料与方法    5
2.1    使用的材料试剂、仪器设备    5
2.1.1 实验菌种    5
2.1.2 实验试剂    5
2.1.3 仪器    6
2.1.4 配置培养基    7
2.2    实验方法    8
2.2.1 在8hr上清液中野生型与突变型适合度差异    8
2.2.2 在接入突变型菌株制备上清液中野生型与突变型适合度差异    8
2.2.3    在不同浓度IPTG的8hr上清液中野生型与突变型适合度差异    9
2.2.4    在17hr上清液中野生型与突变型适合度差异………    .9
2.2.5 在不同时间制备的上清液中野生型与突变型适合度差异………    .9
2.2.6 比较野生型与突变型对200nM/L AHL敏感性差异………    .9
2.2.7 比较野生型与突变型在不同体系下敏感性差异………    .10
2.2.8 比较野生型与突变型对不同浓度AHL敏感性差异………    .10
3    结果与分析    11
3.1 在8hr上清液中野生型与突变型适合度差异    11
3.2 在接入突变型菌株制备上清液中野生型与突变型适合度差异    12
源自六`维`论^文-网.加7位QQ3249^114 www.lwfree.cn

3.3    在不同浓度IPTG的8hr上清液中野生型与突变型适合度差异    13 自杀基因回路控制下野生型与变异型菌群的生长速率比较:http://www.lwfree.cn/shengwu/20170930/14375.html
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