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通过番茄转基因沉默MSHE基因

时间:2017-10-31 15:43来源:毕业论文
外植体在MS+1mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA的进行2 天的预培养后,用农杆菌(浸染浓度为OD=0.6)浸染6 min,转化效率最高。研究表明拟南芥MSHE基因在减数分裂过程中可能起作用
摘要:本次实验以番茄无菌苗的子叶与下胚轴为外植体,通过农杆菌介导法对其遗传转化体系进行了优化,结果表明:外植体在MS+1mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA的进行2 天的预培养后,用农杆菌(浸染浓度为OD=0.6)浸染6 min,转化效率最高。研究表明拟南芥MSHE基因在减数分裂过程中可能起作用,本实验为进一步研究番茄MSHE基因与减数分裂之间的相互关系提供基础。
关键词:根癌农杆菌;番茄;遗传转化。14832
 Study on MSHE Gene Silencing by Agrobacterium tumefaciens Mediated in Tomato
Abstract: Tomato cotyledons and hypocotyls were used as the materials. Tomato transformation system via Agrobacterium tumefaciens was optimized. The results showed that the highest transformation efficiency was obtained when the explants were pre-cultured on medium containing 1.0 mg/L 6-BA and 0.1 mg/L NAA for 2 days. After pre-culture, the explants was infect with  Agrobacterium tumefaciens (OD=0.6) for 6 min followed by co-culturing growing on medium containing 1.0 mg/L 6-BA and 0.1 mg/L NAA for 2 days. It was reported that MSHE gene play a possible role in Arabidopsis meiosis. This study provides the foundation for further research of relationship between MSHE genes and the meiosis.
Key Words: Agrobacterium tumefaciens ; tomato; transgenic transformation
目录
1 引言1
  1.1番茄简介   1
  1.2农杆菌简介 1  1.3农杆菌转化法简介      2
1.4减数分裂简介  2
2 材料与方法 3
2.1 实验材料  3
2.1.1植物材料3
2.1.2 实验器材  3
2.1.3试验试剂  3
2.2 实验方法  4
2.2.1 培养基的制备4
2.2.2 不同消毒方法对番茄种子萌发的影响       5
2.2.3 不同品种番茄的组织培养组织培养再生频率比较     5

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2.2.4 无菌苗的获得  5
2.2.5 预培养               6
2.2.6 共培养(农杆菌的感染)  7
2.2.7 外植体的筛选与分化  10
2.2.8 不定根的诱导          11
2.2.9 再生苗移栽    11
2.2.10农杆菌侵染时间的比较   11
2.2.11农杆菌侵染浓度的比较  11
2.2.12不同抗生素抑制农杆菌效果的比较  12
2.2.13 PVP和活性碳对番茄外植体褐变的影响     12
2.3 培养条件       12
2.4 测定指标与数据处理      12
3 结果与分析  13
3.1不同培养基配方对番茄植株愈伤组织形成的影响 13
3.2 不同处理对愈伤组织不定芽分化的影响     14
3.3 不同消毒方法对番茄种子萌发的影响       15
3.4 不同品种番茄的组织培养再生频率比较     16
3.5 预防外植体褐变的处理       17
3.6 农杆菌侵染不同时间比较 17
3.7 农杆菌侵染浓度的比较 18
3.8 不同抗生素抑制农杆菌效果的比较 18
3.9 组培苗的炼苗与移栽   19
4 结论和讨论20
4.1 不同培养基配方对番茄植株再生频率的影响20
4.2 不同消毒方法对番茄种子萌发的影响20
4.3 不同品种番茄的组织培养组织培养再生频率比较21
4.4 预防外植体褐变的处理  21
  4.5 农杆菌浓度、浸染时间对番茄再生频率的影响21
4.6 番茄组织培养存在的问题及对策21
4.6.1 种子消毒方式和时间        21
4.6.2  污染           22 通过番茄转基因沉默MSHE基因:http://www.lwfree.cn/shengwu/20171031/15517.html
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