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产酯酶微杆菌的发酵优化+文献综述

时间:2018-01-11 14:24来源:毕业论文
论文对一株来源于巧克力微杆菌产酯酶微生物的发酵优化进行了研究。系统研究了碳源、氮源、金属离子、pH值对发酵产酶的影响。发现最适培养条件为:麦芽糖25g/L、酵母膏20g/L、硫酸
摘要:手性药物在新药开发中越来越受到重视。生物催化具有反应条件温和、高度选择性、产物纯度高等优点。手性羧酸(酯)是许多手性药物合成的关键手性砌块,利用微生物水解酶作为生物催化剂可以在温和的条件下合成手性酸及其酯。本毕业论文对一株来源于巧克力微杆菌产酯酶微生物的发酵优化进行了研究。系统研究了碳源、氮源、金属离子、pH值对发酵产酶的影响。发现最适培养条件为:麦芽糖25g/L、酵母膏20g/L、硫酸镁1.0g/L、硫酸亚铁0.3g/L、pH值7.5。经发酵优化后,酶活由初始的0.78U/L提高到46.38U/L,提高了约50倍。17465
关键词:酯酶;水解酶;手性药物;发酵优化
Optimizing the fermentation of an esterase-producing strain from Microbacterium sp.
Abstract: Chiral drugs draw more and more attention in the development of new drugs.Biocatalysis has several advantages such as mild reaction conditions, high selectivity and high product purity. Chiral carboxylic acids (esters) are key chiral building blocks in the synthesis of many chiral drugs. Chiral acid and its ester can be synthesized under mind condtions by using microbial hydrolase as biocatalyst. The optimization of fermentation of an esterase producing strain from Microbacterum chocolatum was studied in this paper. The effect of carbon sources, nitrogen source, pH value and metal ions on enzyme activity during fermentation was systematically investigated. It was found the optimal conditions for the fermentation are the following: maltose 25g/L, yeast extract 20g/L, MgSO4 1.0g/L, FeSO4 0.3g/L, pH 7.5. After optimization, the enzyme activity was increased 50 times (from 0.78U/L to 46.38U/L).
Key Words:Esterase;Hydrolase;Chiral drugs;Optimization of fermentation
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 目 录
1 研究背景    1
1.1 手性合成研究的意义    1
1.2 手性及手性药物简介    2
1.3 生物素简介    2
1.4 水解酶在手性药物合成中的应用    3
1.4.1 酶催化的水解反应    4
1.4.2 酶催化的还原反应    5
1.4.3 酶催化的氧化反应    5
1.4.4 酶催化的酰化反应    6
1.5 水解酶的发酵条件优化    6
1.5.1 碳源的影响    7
1.5.2 初始pH的影响    7
1.5.3 氮源的影响    7
1.5.4 金属离子的影响    7
1.5.5 不同温度的影响    8
1.5.6 天然油脂的影响    8
1.5.7 不同装液量的影响控制    8
1.5.8 表面活性剂的影响    8
1.6 本课题研究的意义及思路    8
2 实验的技术路线和流程    10
2.1 微杆菌发酵优化的技术路线    10
3 试验方法与材料    11
3.1 实验材料    11
3.1.1 主要试剂    11
3.1.2 主要仪器    11
3.2 试验方法    12
3.2.1 优化前培养条件    12
3.2.2 优化培养条件    12
3.2.3 OD值的测定    13
3.2.4 细胞干重的测定    13
3.2.5 酶活测定方法    13
3.2.6 单甲酯标准曲线的绘制    14
4 结果与讨论    15
4.1 碳源优化    15
4.1.1 碳源种类对生长及产酶的影响    15
4.1.2 碳源浓度对生长及产酶的影响    16 源自六/维-论;文;网!加7位QQ324,9114 www.lwfree.cn
4.2 氮源优化    17
4.2.1 氮源种类对生长及产酶的影响    17
4.2.2 酵母膏浓度的对生长及产酶的影响    18 产酯酶微杆菌的发酵优化+文献综述:http://www.lwfree.cn/shengwu/20180111/19138.html
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