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番茄免疫受体蛋白Sw-5b与番茄斑萎病毒移动蛋白NSm互作分子机制研究

时间:2018-08-02 19:58来源:毕业论文
利用免疫共沉淀、 荧光双分子互补、GST pull-down等技术对Sw-5b各结构域与NSm相互作用情况进行初步研究。实验结果表明,Sw-5b N末端结构域NTD1与NSm能发生直接物理互作

摘要:在过去的三十多年中,番茄斑萎病毒(Tomato spotted wilt virus,TSWV)造成的损失逐渐上升,引起农业研究工作者的广泛关注。本实验采用多种方法来研究番茄免疫受体蛋白Sw-5b与病毒移动蛋白NSm的相互作用。本实验利用免疫共沉淀、 荧光双分子互补、GST pull-down等技术对Sw-5b各结构域与NSm相互作用情况进行初步研究。实验结果表明,Sw-5b N末端结构域NTD1与NSm能发生直接物理互作。对抗性基因Sw-5b识的研究,可为番茄斑萎病毒抗性的研究与防治提供行之有效的策略,也为对番茄斑萎病毒属的防治提供借鉴。26622
毕业论文关键词:番茄斑萎病毒;免疫受体Sw-5b;移动蛋白NSm;互作
 Molecular mechanism of tomato immune receptor Sw-5b interacting with the movement protein NSm of tomato spotted wilt virus     
Abstract:Tomato spotted wilt virus(TSWV) is mainly harmful to tomatos , and every year it causes a huge influence in the production of China and world . This experiment uses some methods to research the interaction between the movement protein (NSm) and plant immune receptor protein Sw-5b . This experiment uses Co-Immnunoprecipitation(Co-IP) and BiFC and GST-pull down technique to to do an initial scan of the interaction between every domains of Sw-5b and NSm . The results indicate that , the end of Sw-5b N structural domain NTD1 can occur Physical interactions with NSm . This research can provide basis for a further acknowledge of mechanism to Sw-5b recognizes TSWV , and offer theoretical basis for TSWV of resistance study, prevention and treatment .
 Key words: TSWV;immune receptor Sw-5b;the movement protein NSm ;interaction
目  录
摘要:    1 源¥自%六^^维*论-文+网=www.lwfree.cn
关键词:    1
Abstract:    1
Key words:    1
引言    1
材料与方法    3
1.1 材料    3
1.1.1 植物材料    3
1.1.2 菌株和质粒    3
1.1.3 主要试剂    3
1.2  方法    3
1.2.1 目的基因的扩增和克隆    3
1.2.2 载体的构建    4
1.2.3 重组质粒转化根癌农杆菌GV3101    4
1.2.4 根癌农杆菌注射烟草及瞬时表达    4
1.2.5 蛋白提取及免疫共沉淀    4
1.2.6 SDS-PAGE及Western blot检测    4
1.2.7 融合蛋白的诱导表达与纯化    4
1.2.8 Sw-5b和NSm分子相互结合的BiFC分析    5
1.2.9 GST pull-down实验    5
2  结果与分析    5
2.1 蛋白互作情况的检测    5
2.2 Sw-5b和NSm分子相互结合的BiFC分析    6
2.3 GST-NTD1融合蛋白的诱导表达与纯化    6
2.4 NSm-His融合蛋白的诱导表达与纯化    7
2.5  GST pull-down试验    7
3  讨论    7
致谢    8
参考文献:    9
番茄免疫受体蛋白Sw-5b与番茄斑萎病毒移动蛋白NSm互作分子机制研究
番茄斑萎病毒(Tomato spotted wilt virus,TSWV)在病毒性病原物种中,是最具有危害性的一种。它属于番茄斑萎病毒属(Tospovirus),布尼亚病毒科(Bunyaviridae),而且它在世界范围内进行广泛为害,侵染多种经济作物[1]。已经确定的寄主主要有番茄,辣椒,花生,莴苣等(Goldbach and Peters, 1994)。进行控制侵染是非常困难的,不仅因为它可以侵染多种植物,同时,它还以多种蓟马为传播媒介。其中最主要的传播媒介是西花蓟马(Frankliniella occidentalis)[2]。中国在2003年检测出西花蓟马,随后也在全国迅速扩散,在四川、云南、广州等地的多种观赏植物上检测到。因为番茄斑萎病毒是通过昆虫介体来传播的,因此能够有效防治番茄斑萎病毒的方法是筛选培育抗病品种,同时也更加经济、安全、有效。 番茄免疫受体蛋白Sw-5b与番茄斑萎病毒移动蛋白NSm互作分子机制研究:http://www.lwfree.cn/shengwu/20180802/20856.html
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